تمامی فایل های موجود در نیکان فایل، توسط کاربران آپلود می شوند. لطفاً اگر تخلفی مشاهده کردید یا مالک فایلی هستید که بدون اطلاع شما در سایت قرار گرفته، به ما اطلاع دهید.
عضویت در خبرنامه

پاورپوینت روش های استخراج (DNA) از بدن

DNA EXTRACTION METHODS What are the essential components of a DNA extraction Procedure? Maximize DNA recovery Remove inhibitors Remove or inhibit nucleases Maximize the quality of DNA Double strand vs. Single strand (RFLP or PCR) How Much DNA Can We

کد فایل:14946
دسته بندی: عمومی » سایر

تعداد مشاهده: 4385 مشاهده

فرمت فایل دانلودی:.zip

فرمت فایل اصلی: power point

تعداد صفحات: 55

حجم فایل:9,725 کیلوبایت

  پرداخت و دانلود  قیمت: 30,000 تومان
پس از پرداخت، لینک دانلود فایل برای شما نشان داده می شود.
0 0 گزارش
  • مشخصات فایل:
    پاورپوینت روش های استخراج (DNA) از بدن
    قالب بندی: پاورپوینت (قابل ویرایش)
    تعداد اسلاید: 55

    بخشی از پاورپوینت:

    DNA EXTRACTION METHODS
    What are the essential components of a DNA extraction Procedure?
    Maximize DNA recovery
    Remove inhibitors
    Remove or inhibit nucleases
    Maximize the quality of DNA
    Double strand vs. Single strand (RFLP or PCR)
    How Much DNA Can We Recover?
    A Diploid Cell contains approximately 6 pg of DNA
    Sperm contains approximately 3 pg of DNA
    The average WBC of an adult is 5 - 10 X 106 cells per ml of blood.  Therefore, the theoretical recovery of DNA per ul of blood is 30 - 60 ng.
    How Much DNA Do We Need?
    The RFLP procedure on requires a minimum of 50 ng of high molecular weight double stranded DNA. This is the equivalent of approximately 2 ul of blood.  The number of intact sperm ( 3 pg/sperm) is approximately 20,000.
    How Much DNA Do We Need?
    The PCR reactions call for on average 1 ng of DNA (single or double stranded). 
    This is the equivalent of 1/20 of 1 ul of blood, or 350 sperm.
    Many of the commercially available kits  are sensitive below 1 ng of DNA (100-250 pg).
    What are the Most Commonly used DNA Extraction Procedures in Forensic Science?
    Organic (Phenol-Chloroform) Extraction
    Non-Organic (Proteinase K and Salting out)
    Chelex (Ion Exchange Resin) Extraction
    FTA Paper (Collection, Storage, and Isolation)
    ORGANIC EXTRACTION
    Perhaps the most basic of all procedures in forensic molecular biology is the purification of DNA.  The key step, the removal of proteins, can often be carried out simply by extracting aqueous solutions of nucleic acids with phenol and/or chloroform.
    ORGANIC EXTRACTION PROCEDURE
    Cell Lysis Buffer - lyse cell membrane, nuclei are intact, pellet nuclei.
    Resuspend nuclei, add Sodium Dodecly Sulfate (SDS), Proteinase K. Lyse nuclear membrane and digest protein.
    DNA released into solution is extracted with phenol-chloroform to remove proteinaceous material.
    DNA is precipitated from the aqueous layer by the additional of ice cold 95% ethanol and salt
    Precipitated DNA is washed with 70% ethanol, dried under vacuum and resuspended in TE buffer.
    ORGANIC EXTRACTION REAGENTS
    Cell Lysis Buffer - Non-ionic detergent, Salt, Buffer, EDTA designed to lyse outer cell membrane of blood and epithelial cells, but will not break down nuclear membrane. 
    EDTA (Ethylenediaminetetraacetic disodium salt) is a chelating agent of divalent cations such as Mg2+. Mg2+is a cofactor for Dnase nucleases.  If the Mg2+is bound up by EDTA, nucleases are inactivated.
    ORGANIC EXTRACTION REAGENTS
    Proteinase K - it is usual to remove most of the protein by digesting with proteolytic enzymes such as Pronase or proteinase K, which are active against a broad spectrum of native proteins, before extracting with organic solvents. Protienase K is approximately 10 fold more active on denatured protein. Proteins can be denatured by SDS or by heat.
    ORGANIC EXTRACTION REAGENTS
    Phenol/Chlorform - The standard way to remove proteins from nucleic acids solutions is to extract once with phenol, once with a 1:1 mixture of phenol and chloroform, and once with chloroform.  This procedure takes advantage of the fact that deproteinization is more efficient when two different organic solvents are used instead of one.
    Also, the final extraction with chloroform removes any lingering traces of phenol from the nucleic acid preparation.
    Phenol is highly corrosive and can cause severe burns.
    ORGANIC EXTRACTION REAGENTS
    Phenol -  often means phenol equilibrated with buffer (such as TE) and containing 0.1% hydroxyquinoline and 0.2% b-mercaptoethanol (added as antioxidants. The hydoxquinoline also gives the phenol a yellow color,making it easier to identify the phases (layers).
    Chloroform - often means a 24:1 (v/v) mixture of chloroform and isoamyl alcohol.  The isoamyl alcohol is added to help prevent foaming.
    The Phenol/Chloroform/Isoamyl Alcohol ratio is 25:24:1
    Concentrating DNA Alcohol Precipitation
    The most widely used method for concentrating DNA is precipitation with ethanol. The precipitate of nucleic acid, forms in the presence of moderate concentrations of monovalent cations (Salt, such as Na+), is recovered by centrifugation and redissolved in an appropriate buffer such as TE.
    The technique is rapid and is quantitative even with nanogram amounts of DNA.
    Concentrating DNA Alcohol Precipitation
    The four critical variables are the purity of the DNA, its molecular weight, its concentration, and the speed at which it is pelleted.
    DNA a concentrations as low as 20 ng/ml will form a precipitate that can be quantitatively recovered.
    Typically 2 volumes of ice cold ethanol are added to precipitate the DNA.
    Concentrating DNA Alcohol Precipitation
    Very short DNA molecules (<200 bp) are precipitated inefficiently by ethanol.
    The optimum pelleting conditions depend on the DNA concentration. Relatively vigorous microcentrifuge steps such as 15 minutes at or below room temperature at 12,000 rpm are designed to minimized the loss of DNA from samples with yields in the range of a few micrograms or less.
    Concentrating DNA Alcohol Precipitation
    Solutes that may be trapped in the precipitate may be removed by washing the DNA pellet with a solution of 70% ethanol.  To make certain that no DNA is lost during washing, add 70% ethanol until the tube is 2/3 full.  Vortex briefly, and recentrifuge.  After the 70% ethanol wash, the pellet does not adhere tightly to the wall of thetube, so great care must be taken when removing the supernatant.
    Concentrating DNA Alcohol Precipitation
    Isopropanol (1 volume) may be used in place of ethanol (2 volumes) to precipitate DNA.  Precipitation with isopropanol has the advantage that the volume of liquid to be centrifuged is smaller.
    Isopropanol is less volatile than ethanol and it is more difficult to remove the last traces; moreover, solutes such sodium chloride are more easily coprecipitated with DNA when isopropanol is used.
    Concentrating DNA Microcon®100 Centrifugal Filter Unit
    Concentrating DNA Microcon®100 Centrifugal Filter Unit
    Excellent recovery of DNA samples with recoveries typically > 95%.
    Ideal for dilute (ng/mL to µg/mL range) of DNA solutions
    Concentrating and purifying proteins, antibodies and nucleic acids (alternative to EtOH precipitation)
    Desalting and buffer exchange
    Removal of primers, linkers and unincorporated label


    - این پاورپوینت کاملا استاندارد بوده و در تهیه آن کلیه اصول نگارشی رعایت شده است. 





    برچسب ها: روش های استخراج DNA از بدن پاورپوینت روش های استخراج DNA از بدن دانلود رایگان پاورپوینت روش های استخراج DNA از بدن دانلود پاورپوینت روش های استخراج DNA از بدن دانلود پاورپوینت در مورد روش های استخراج DNA از بدن تحقیق روش های استخراج DNA از
  • برای استفاده از فایل، ابتدا آن را با با نرم افزار Winrar، از حالت فشرده خارج نمایید. برای دانلود رایگان نرم افزار Winrar، این جا کلیک کنید.
  • در قالب ppt و در 55 اسلاید، قابل ویرایش.
  • سوالات خود را درباره این فایل پرسیده، یا نظرات خود را جهت درج و نمایش بیان کنید.

  • ضمانت بازگشت وجه، در صورت وجود مغایرت

    توجه داشته باشید که در صورتی که توضیحات فایل خریداری شده با محتوای آن مغایرت داشته باشد، می توانید تا 24 ساعت پس از خرید، درخواست بازگشت وجه پرداخت شده دهید. درخواست در اسرع وقت رسیدگی خواهد گردید.
  • کد تخفیف 10 درصدی، امکان جدیدی است که به سایت اضافه شده و هر نفر پس از خرید یک فایل، این کد را دریافت می نماید. به این صورت که با خرید هر یک از فایل های سایت و در صورت موفق بودن تراکنش، به همراه لینک دانلود و ایمیل ارسال شده، کد منحصر به فردی به خریدار داده خواهد شد که در خرید بعدی و با وارد کردن آن کد، 10 درصد از قیمت فایل بعدی کسر خواهد گردید.
    هم چنین با خریدهای بعدی نیز، کد جدید به خریدار ارسال خواهد شد. بنابراین در خرید اول 100 درصد قیمت فایل و در خریدهای بعدی 90 درصد قیمت فایل پرداخت خواهد شد.
  

ایجاد فروشگاه اختصاصی

شما با عضویت در سایت، بلافاصله می توانید صاحب یک فروشگاه اختصاصی شوید.

فروشگاه ساز رایگان فایل nikanfile.com

به ما اعتماد کنید

تمامي كالاها و خدمات اين فروشگاه، حسب مورد داراي مجوزهاي لازم از مراجع مربوطه مي‌باشند و فعاليت‌هاي اين سايت تابع قوانين و مقررات جمهوري اسلامي ايران است.

0933 190 4210

درباره ما

نیکان فایل، مرجع تخصصی خرید و فروش فایل های قابل دانلود، شامل انواع پاورپوینت، گزارش، پرسشنامه، مقاله ترجمه شده و ...
در صورتی که نیاز به راهنمایی دارید، صفحه راهنمای سایت را مطالعه فرمایید.

کلیه حقوق این سایت، محفوظ است. کپی برداری، پیگرد قانونی دارد.
logo-samandehi
نماد اعتماد الکترونیک

تمامي كالاها و خدمات اين فروشگاه، حسب مورد داراي مجوزهاي لازم از مراجع مربوطه مي‌باشند و فعاليت‌هاي اين سايت تابع قوانين و مقررات جمهوري اسلامي ايران است.